Huỳnh Anh Tuấn sinh năm 1968 từng theo gia đình sang Mỹ định cư năm 12 tuổi. Sau khi tốt nghiệp Đại học Nghệ thuật và thiết kế Minneapolis (thuộc bang Minnesota, Mỹ), anh đi làm rồi trở thành giám đốc chi nhánh một công ty chuyên chụp ảnh quảng cáo. Cơ duyên với nghệ thuật tìm đến khi Huỳnh Anh Tuấn góp mặt trong các clip ca nhạc của ca sĩ Phi Nhung ở hải ngoại. Đam mê nghệ thuật, anh quyết định trở về Việt Nam, theo đuổi nghiệp diễn cho đến nay.

Phim đầu tiên giúp Huỳnh Anh Tuấn được khán giả biết đến rộng rãi là Em và Michael (năm 1993, đóng cùng Trương Ngọc Ánh). Từ đó đến nay, anh đã tham gia hàng trăm bộ phim lớn nhỏ với đủ loại vai, có thể kể đến những tác phẩm nổi tiếng như: Biển động; Đất khách; Những đứa con thành phố; Hương phù sa... Nam diễn viên gốc Vĩnh Long trở thành ngôi sao màn bạc đình đám, đóng cặp với nhiều nữ diễn viên nổi tiếng lúc bấy giờ như Việt Trinh, Diễm Hương, Y Phụng, Trương Ngọc Ánh…

Với ngoại hình phong độ, cao lớn, anh thường được mời thể hiện vai giám đốc, ông trùm xã hội đen trong các phim truyền hình. Vẻ sang chảnh, lịch lãm cũng giúp anh nhận vai vua Bảo Đại trong phim Ngọn nến hoàng cung. Dù là vai chính diện hay phản diện, anh đều hóa thân xuất sắc.

Gần 30 năm làm nghệ thuật, Huỳnh Anh Tuấn có gia tài điện ảnh khá đồ sộ gồm gần 200 vai diễn trong phim điện ảnh và truyền hình. Khi phim truyền hình nở rộ, anh trở thành nam diễn viên tuổi trung niên đắt show nhất nhì showbiz Việt.

Có lần, Huỳnh Anh Tuấn cùng lúc đảm nhận đến 3 vai nên gặp nhiều áp lực. Nam diễn viên từng tâm sự: "Đóng cùng lúc 3 phim cũng tạo cho tôi nhiều áp lực, đôi lúc khiến tôi bị stress. Vì thế tôi luôn thu xếp để dành thời gian nhất định cho mỗi vai diễn và cũng có thời gian để thoát khỏi vai này mới nhập vào vai khác".

Ở tuổi xế chiều, Huỳnh Anh Tuấn vẫn rất phong độ dù ngoại hình đã không còn trẻ trung như trước. Như phần đông anh em nghệ sĩ, anh cũng phải xoay xở làm nhiều công việc khác để “nuôi” nghề diễn và chăm lo gia đình. Anh từng phụ cha làm xây dựng, mở nhà hàng bán đồ ăn Ý nhưng chẳng được bao lâu đã phải đóng cửa vì nhà hàng chỉ có lãi lúc anh hiện diện, còn khi anh đi đóng phim thì thu không đủ bù chi. Mặc dù đóng phim là công việc cực nhọc, thu nhập không đủ sống nhưng anh thú nhận vẫn còn rất đam mê điện ảnh.

Nghệ sĩ thường lái xe từ TP HCM về quê ngoại ở Long An vào những ngày không có lịch quay, hòa vào cuộc sống như nông dân. Nhà vườn của diễn viên trồng nhiều cây ăn quả như dừa, mít, sầu riêng, măng cụt, ổi, cùng các loài rau gồm cải, mồng tơi, mướp, đậu bắp... Hồi cuối tháng 7/2023, anh mất ba ngày dựng thêm chiếc chòi lá để nghỉ ngơi, có chỗ nấu nướng. Buổi sáng thức dậy, nam diễn viên thường pha trà, tận hưởng không khí mát lành.

Huỳnh Anh Tuấn xới đất gieo hạt giống, ra chợ mua thêm hoa, cây cảnh để khu vườn thêm màu sắc. Anh còn cải tạo ao, thả thêm cá rô, cá diêu hồng.

Được mọi người động viên, Huỳnh Anh Tuấn lập tài khoản trên mạng xã hội TikTok, ghi lại cảnh sinh hoạt, giao lưu cùng fan. Các video được nhận xét mang vẻ gần gũi, hút hàng chục triệu lượt xem, kênh đạt gần nửa triệu lượt theo dõi chỉ sau gần một tháng.

Về chuyện tình cảm, nam diễn viên từng đổ vỡ hôn nhân. Anh có bốn người con với người vợ đầu. Huỳnh Anh Tuấn đi bước nữa vào năm 2016 ở tuổi 48. Anh cưới nữ diễn viên tên Thảo Sương, người từng đóng vai phụ trong một số phim truyền hình. Sau đám cưới, cô quyết định ở nhà làm nội trợ, quán xuyến gia đình để ông xã yên tâm hoạt động nghệ thuật. Anh hầu như rất hiếm chia sẻ hình ảnh về cuộc sống riêng tư lên mạng xã hội.

Hiện tại, Huỳnh Anh Tuấn vẫn xuất hiện trong các bộ phim truyền hình hay web-drama. Gần đây, Huỳnh Anh Tuấn nhận kịch bản với vai ác nhiều hơn để tránh nhàm chán. Anh cũng sẵn sàng chia sẻ kinh nghiệm cho thế hệ đàn em, mong muốn điện ảnh nước nhà có thêm nhiều tài năng.